Для определения рода слова “ротмистр” его необходимо поставить в именительный падеж единственного числа, получается форма: “ротмистр” . Тогда в зависимости от окончания в слове “ротмистр” можно определить род.
Слово “ротмистр” употребляется в мужском роде (Потому как в начальной форме слова “ротмистр” окончание [а], [я] или [ ] нулевое).Полный морфологический разбор Cуществительного “ротмистр” находится по ссылке